参考答案：E

解析：丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、果糖双磷酸酶-1及葡萄糖-6-磷酸酶是糖异生过程中的4个关键酶。只有E（6-磷酸果糖激酶-1）是糖酵解的关键酶之一，其不参与糖异生作用。