参考答案：E

解析：前四项检查分别检查肢体有无缺血、浅静脉瓣膜功能、深静脉通畅、穿通静脉瓣膜功能，静脉造影是原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全的金标准。故答案应选E。