问题
问答题
TFA是5s rRNA基因表达所需的转录因子，这个蛋白含有9个锌指结构域，与5s rRNA基因内的一段序列和5s rRNA本身结合。(1)如何定位TFⅢA蛋白的DNA结合位点(2)什么样的突变可以证明锌指是DNA结合所需的(3)有人发现TFⅢAC端缺失19个氨基酸后与DNA结合的能力与野生型一样，但是不能激活5S rRNA基因的转录，请解释原因。(4)非洲爪蟾(Xeropus laevis)的卵母细胞中合成并贮存了大量的5S rRNA，随着5S rRNA的积累，TFⅢA与之结合，这对5S rRNA基因的转录有何影响调控这个过程的机制是什么
答案
参考答案：(1)利用足迹法或碱基修饰法定位TFⅢA蛋白的DNA结合位点。(2)影响到锌指结构形成的突变(如无法形成TFⅢA蛋白C端α-螺旋的突变)，可证明锌指是DNA结合所需的。(3)TFⅢAC端的非保守性氨基酸可能负责识别特异的DNA目标位点，C端缺失19个氨基酸后，虽与DNA结合的能力不变，但由于DNA特异位点的选择出现问题，所以无法激活5s rRNA基因的转录。(4)随着5srRNA的积累，TFⅢA与之结合，这对5s rRNA基因的转录具有阻抑作用。调控这个过程的机制是自体调控。