问题
单项选择题 A1/A2型题
煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠埃希菌菌株中小量制备质粒时,不应省掉的步骤是()
A.溶菌酶处理
B.PEG处理
C.DNA聚合酶催化
D.酚-氯仿抽提
E.胰蛋白酶处理
答案
参考答案:D
解析:煮沸法不能完全灭活核酸内切酶A,在Mg存在下温育质粒DNA可被降解。若要避免这一问题,可以在用70%乙醇洗涤前增加一步用酚氯仿进行抽提,可以抑制酶的活性。
煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠埃希菌菌株中小量制备质粒时,不应省掉的步骤是()
A.溶菌酶处理
B.PEG处理
C.DNA聚合酶催化
D.酚-氯仿抽提
E.胰蛋白酶处理
参考答案:D
解析:煮沸法不能完全灭活核酸内切酶A,在Mg存在下温育质粒DNA可被降解。若要避免这一问题,可以在用70%乙醇洗涤前增加一步用酚氯仿进行抽提,可以抑制酶的活性。