参考答案：

辅酶和辅基的区别在于与酶的结合是否紧密。

比如辅酶中著名的FADH，NADH，NADPH，都可以以不与酶结合的形式存在，并可结合成为多种酶的辅酶，它的游离特性在功能上保证了辅酶的运载能力。

辅基与酶不能分开。酶失去了辅基就无法实现它的功能，失去了活性。离开了酶辅基也无法单独存在。底物纯粹是酶催化反应的反应物。