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鉴定细胞凋亡有什么常用方法?

答案

参考答案:

1、形态学观测应用各种染色法可观察凋亡细胞的形态学特征,如台盼蓝,DAPI,Giemsa染色法,此外还可用透射和扫描电镜观察凋亡细胞。

2、DNA电泳细胞凋亡时,细胞内特异性核酸内切酶活化,染色质DNA在核小体间被特异性切割,DNA降解成200bp或其整数倍,电泳时出现DNAladder。

3、TUNEL测定法末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法,对DNA分子断裂缺口中的3‘-OH进行原位标记。

4、彗星电泳法彗星电泳法的原理是将单个细胞悬浮于琼脂糖凝胶中,经裂解处理后,再在电场中进行短时间的电泳,并用荧光染料染色,凋亡细胞中形成的DNA降解片段,在电场中泳动速度较快,使细胞核呈现出一种彗星式的图案,而正常的无DNA断裂的核在泳动时保持圆球形,这是一种简便的凋亡检测法。

5、流式细胞分析运用流式细胞仪能够检测出凋亡的亚二倍体细胞。

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