问题
问答题
什么是氨基酸的Rf值一般用什么方法测定Rf值如何证明一个氨基酸样品中是否含有脯氨酸简述基本原理。
答案
参考答案：[答题要点]
(1)Rf值表示氨基酸的相对迁移率，即氨基酸离开原点的迁移距离与溶剂前沿的距离之比。
(2)一般用纸层析(或薄层层析)技术。首先利用纸层析分离样品中的氨基酸，并用水合茚三酮显色；然后分别测出氨基酸离开原点的迁移距离与溶剂前沿的距离，即可计算出氨基酸Rf值。
(3)如果滤纸上有黄色斑点，则证明氨基酸样液中含脯氨酸。因为脯氨酸为α-亚氨基酸，侧链为杂环结构，没有自由的α-氨基，它与水合茚三酮反应生成黄色物质。而其他α-氨基酸含有自由的α-氨基和α-羧基，和水合茚三酮反应生成紫色化合物。
解析： 氨基酸纸层析；氨基酸相对迁移率；脯氨酸茚三酮显色的特殊性。
[知识扩展] 纸层析技术用于氨基酸的分离和鉴定非常方便。利用薄层层析也可以测定氨基酸Rf值。这些方法的基本原理都是基于分配层析，或者说氨基酸的溶解度。茚三酮试剂常用于纸层析或薄层层析后的氨基酸斑点的显色，也可用于溶液中氨基酸的定量检测。