问题 问答题

用不同的限制酶PstⅠ和Sal Ⅰ切割同一染色体DNA并克隆。利用X基因两端引物进行菌落扩增,在Pst Ⅰ切割的克隆中未能筛到X基因,但Sal Ⅰ切割的克隆中筛到了X基因,为什么?

答案

参考答案:

基因中可能存在PstⅠ识别位点,X基因被切成两段,全长基因不在同一克隆中,所以利用基因两端特异引物扩增时,扩增不到X基因。该基因中不存在Sal Ⅰ识别位点,全长基因在同一克隆中,所以利用基因两端特异引物扩增时,扩增到X基因。

选择题
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