参考答案：随着基因序列测定的进展，要了解基因的功能，必须把基因连入各种载体，进行蛋白质表达、抗体制备、转化、表型分析、细胞内定位及蛋白质相互作用等后续研究，Gateway基因大规模克隆技术可以完成基因的大规模克隆。它利用λ噬菌体进行位点特异性DNA片段重组，使基因快速克隆和在载体间平行转移。主要包括TOPO反应和LR反应，TOPO反应是将目标基因连入Entry载体，载体上的CCCTT被拓扑异构酶识别，切开后将此酶偶联在载体上，形成3’突出端GTGG，加入PCR产物，与PCR产物的接头序列CACC退火，切去GTGG后使PCR产物的正确方向连入．Entry载体。LR反应是将目的片段从Entry载体重组入表达载体，Entry载体上基因两端具att L1和att L2位点，目的载体上含att R1和att R2位点，在重组蛋白作用下发生定向重组，形成新位点att B1和att B2，可将目的基因转移到表达载体中。从而，利用此技术完成大规模基因的克隆和表达。