问题
问答题
什么是细菌的蓝白斑筛选法?
答案
参考答案:
细菌的篮白斑筛选又称α-互补法,是根据组织化学的原理来筛选重组体的方法。指在载体的非必要区插入带有β-半乳糖苷酶N端含145个氨基酸(α肽)的编码序列,并在此编码序列中插入一个多克隆位点区,它不破坏操纵子的阅读榧,产生蛋白时只是在β-半乳糖苷酶的氨基端增加几个氨基酸而不影响功能;转化含缺陷型β-半乳糖苷酶(ω肽)的宿主菌后,两部分缺失片段可以功能互补,能产生有活性的β-半乳糖苷酶,在含有X-Gal和IPTG的平板上形成蓝色菌斑。当有外源DNA插入片段后,lac Z失活,丧失了分解X-Gal的能力,形成白色菌斑。所以重组体为白斑,非重组体为蓝斑,称细菌的蓝白斑筛选法。