问题
问答题
基因敲除的机理是什么在对基因敲除实验结果进行分析时,需注意什么问题试分析可能的原因是什么
答案
参考答案:基因敲除(gene knock-out)技术是在基因定位整合基础上建立的一种新兴的生物技术。用基因转移方法把一段DNA转移到受体细胞,此DNA可代替受体细胞染色体基因组上一段长度相同的DNA片段。目前常选用基因重组的方式进行基因敲除。利用同源重组定位突变进行基因敲除,使该基因功能丧失;也可以敲除基因的一部分观察其功能细节。同样,除对结构基因突变外,还可敲除调控元件及反式作用因子的基因,以研究其功能。
在进行实验结果分析时,需注意:应考虑系统的整体性与系统诸要素之间的相关性,对于小系统的现象,应全面考虑,不能局限。因为当某一基因被敲除后,该基因在正常状态下特异表达的组织中并非都出现纯合突变体表型。这一现象可能的原因包括:(1)该基因产物可能对其所表达的组织并非绝对必要;(2)常规观察方法不能检测到组织细胞内部的细微变化;(3)可能存在其他的功能补偿基因,弥补了突变的缺陷。另外,同源异形基因具瞬间表达的特性,不易在基因敲除系统中反映出来。总之,诸多因素使得我们进行结果分析时要注意系统相关性。