细菌基因定位的方法有哪些各有何特点
参考答案:由于细菌为原核生物,其遗传方式不同于真核生物,不能以后代的分离比来计算基因间的重组值,只能靠一些特有的方法来进行基因定位和作图。这些方法包括:中断杂交作图、重组作图、转化作图和转导作图等。
中断杂交作图就是将多标记的Hfr菌株和F-菌株混合后进行接合,培养不同时间后取样,通过剧烈搅拌或震荡使接合中的细菌细胞相互脱离,即中断杂交,然后在限制培养基上(Hfr细胞在该培养基上不能生长)继续培养,看有哪些原属于Hfr菌株的性状出现在F-菌株中。两个菌株混合培养的时间越长,在F-菌株中出现的Hfr菌株的性状越多,在一个特定的接合过程中,首先在F-细胞中出现的性状是固定不变的,而且各种性状的出现有一定的先后次序,以Hfr菌株染色体上的基因在F-菌株中出现的先后次序和时间为依托,可以画出基因的连锁图。它是根据基因转移的先后次序,以时间为图距单位来测定基因的连锁关系的。
所谓重组作图法是利用Hfr菌株与F-菌株杂交后,在部分二倍体中,若两个基因相距越近,在重组体中出现的机会越多,两基因相距越远,在重组体中出现的机会就越少,这样就可以根据重组体中某一性状单独出现的频率,作为两个基因之间的重组值或图距,再进行基因定位。其精确性高于中断杂交作图,它们都需要Hfr细胞。
转化作图与重组作图原理一致,只是裸露的外源DNA对受体细菌的转化,不需Hfr细胞的参与。
转导作图是利用噬菌体为媒介,把一个细菌的基因导入到另一个细菌,形成的部分二倍体可以发生重组,由于转导子频率最低的类型肯定是最难转导的,它需要同时进行多次交换,所以在这类转导子中两边的为供体基因,中间的为受体基因,这样就可以对基因进行定位排序。