问题 问答题 简答题

有机溶剂沉淀(降低介电常数):

答案

参考答案:利用酶等蛋白质在有机溶剂中的溶解度不同而使之分离的方法。

1.淀机理:降低溶液的介电常数;引起蛋白质脱水

2.用有机溶剂:丙酮乙醇甲醇,用量一般为酶液体积的2倍左右,终浓度为70%。

3.点:

优点:

①分辨率比盐析法高

②沉淀不需脱盐

③溶剂易蒸发,沉淀易离心。

缺点:

①容易引起蛋白质变性失活

②有机溶剂易燃、易爆,对安全要求较高。

4.响有机溶剂沉淀的因素

①温度:低温(0℃)操作。

②pH值:尽可能靠近其等电点。

③离子强度:采用<0.05mol/L的稀盐溶液,增加蛋白质在有机溶剂中的溶解度,目的:防止蛋白质变性

④蛋白质浓度:适当,一般为5〜20mg/ml

填空题
单项选择题 B1型题