参考答案：D

解析：基因工程中需要用同一种限制酶切割目的基因和载体，A错误；基因工程的操作环境是体外，B错误；作为运载体的质粒必须具备一定的条件：有限制酶切点、有复制原点、有标记基因等，C错误；故本题选D，目的基因的人工合成中需要清楚蛋白质的氨基酸排列顺序。考点：基因工程点评：本题考查了基因工程的相关知识，属于对识记、理解层次的考查。