参考答案：

（1）样品制备，包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等。

（2）固相pH值梯度胶（IPG）胶的制备，利用不同pH固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶。

（3）双向电泳，先作第一向电泳，再进行第二向电泳。

（4）蛋白质的染色，主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择，常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。