对细菌种属的鉴定，下列哪项方法不是必须的（）

A.形态染色观察

B.分离培养、菌落观察

C.生化试验

D.药敏试验

E.血清学鉴定

幼儿，7岁，骤然起病，恶寒高热3周，左小腿肿痛，膝关节活动受限，左小腿弥漫性红肿，广泛压痛、膝关节积液，浮髌试验阳性，关节穿刺为浆液性渗出，X线片示左胫骨上端骨皮质散在虫蚀样骨破坏，骨膜反应明显，血象：白细胞总数15.6×10 9/L，分层穿刺见软组织内与骨膜下大量积脓，切开引流后体温下降，急性症状消退，其转归是

A．痊愈

B．形成慢性骨髓炎

C．形成硬化性骨髓炎

D．形成Brodie骨脓肿

E．以上都不是