在孟德尔的豌豆杂交实验中，必须对母本采取的措施包括（）

①开花后人工去雄

②自花受粉前人工去雄

③去雄后自然受粉

④去雄后人工授粉

⑤授粉后套袋隔离

⑥授粉后自然发育

A.①③⑥

B.①③⑤

C.②④⑤

D.④⑤⑥