在孟德尔的豌豆杂交实验中，必须对母本采取的措施是（）

①开花前人工去雄

②开花后人工去雄

③自花受粉前人工去雄

④去雄后自然受粉

⑤去雄后人工授粉

⑥授粉后套袋隔离

⑦授粉后自然发育

A.①④⑦

B.②④⑥

C.③⑤⑥

D.①⑤⑥