参考答案：

（1）固定化时，酶活力有损失；

（2）增加了固定化的成本，工厂开始投资大

（3）只能用于水溶性底物，而且较适用于小分子底物，对大分子底物不适宜

（4）与完整菌体相比，不适于多酶反应，特别是需要辅因子的反应

（5）胞内酶必须经过酶的分离手续