参考答案：B

解析：

属于DNA聚合酶与DNA连接酶化学本质都是蛋白质，A错；DNA聚合酶的作用对象是单个的脱氧核苷酸，DNA连接酶的作用对象是DNA片段，B正确；催化形成的化学键都是磷酸二酯键，C错；DNA聚合酶作用需要模板，DNA连接酶作用不需要模板，D错。

考点：本题考查DNA聚合酶与DNA连接酶的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。