简述核酸分子杂交的技术过程
参考答案:
探针的制备:核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段,可用于检测待测样品中是否存在与探针相同或相近的DNA序列。核算探针有示踪物。
待测核酸的处理:在这个过程中,通过虹吸或电泳的作用将待测双股DNA转移、固定到固相基质如硝酸纤维素膜上,经一定温度或碱变性使DNA双股螺旋解开成两股单链DNA,这过程叫变性
杂交与漂洗:将带有待测DNA单链的膜放入含核酸探针的溶液中,当探针与待测DNA单链具有互补序列时,讲发生杂交,所形成的的杂种分子很难再解链,因此,可以用漂洗法去掉游离的没有杂交上的探针分子
结果分析:可通过放射自显影的方式或其他化学反应确定是否有杂交发生