动物的肝脏具有再生的功能,即肝脏在切除一部分后,剩余的部分会出现增生。研究表明,肝脏在再生过程中表达多种可以促进肝细胞生长的蛋白因子。请你设计一个实验流程,来发现这些蛋白因子,克隆这些蛋白因子的基因,并初步验证它们的功能。
参考答案:(1)发现蛋白因子。建立动物肝脏切除再生模型,同时建立假手术组动物模型作为对照组;提取再生肝脏蛋白和假手术组动物肝脏蛋白,用双向电泳技术比较两者的差异,鉴定出再生肝脏中特异表达的蛋白。
(2)克隆蛋白因子的基因。运用质谱技术,对照已有的蛋白数据库,确定再生肝脏中特异表达的蛋白,根据蛋白序列设计引物,RT-PCR得到相关基因。
(3)验证功能。将相关基因导入真核表达载体,并将重组质粒导入酵母细胞,提取纯化蛋白,检测该蛋白是否具有促进肝细胞增殖的功能;或在肝脏细胞中诱导表达该基因,检测是否促进细胞增殖。
上述答案仅作参考,可以从其他角度设计实验。