问题
问答题
某研究生纯化得到大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ,并试图通过实验研究它们的功能。首先将大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ分别与来自T7噬菌体的DNA模板反应20分钟,然后在两个反应管中各自加入等量的来自T3噬菌体的DNA模板,已知新加入的T3噬菌体DNA的量远高于原有的T7噬菌体的量,并在加入后继续反应40分钟。反应结束后分析各组DNA的产物发现,使用DNA聚合酶Ⅰ催化的,其产物基本都是T3噬菌体DNA,而使用DNA聚合酶Ⅲ催化的,其产物基本都是T7噬菌体DNA,试解释原因。
答案
参考答案:大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ是负责细菌基因组DNA复制的酶,在催化DNA复制的反应过程中有很好的行进性,不会轻易中断,20分钟后即使加入了大量的T3噬菌体DNA模板,DNA聚合酶Ⅲ仍在继续完成原有T7噬菌体DNA模板的复制,所以其产物基本都是T7噬菌体DNA。
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的功能是填充DNA复制中RNA引物切除后留下的缺口,及参与DNA修复,主要催化小片段DNA合成,行进性差。因此加入大量的T3噬菌体DNA模板后,它们很快转向催化T3噬菌体DNA的复制,产生大量的T3噬菌体DNA。