问题
问答题
使用双脱氧法测定DNA序列的实验中，靠近或远离测序引物的核苷酸序列经常会测不准，请解释原因并提出简单易行的方法解决上述问题。
答案
参考答案：(1)DNA引物与模板退火后，在刚开始合成DNA互补链的时候，ddNTP掺入的概率很低，难以形成有效的DNA合成终止，因而无法测出靠近引物的序列。相反远离引物的模板，则会由于ddNTP的掺入，导致DNA合成的提前终止，因而无法获得远离测序引物的核苷酸序列。
(2)解决方法：如精确测定靠近引物的序列，则提高反应体系中ddNTP的浓度；如精确测定远离引物的序列，则降低反应体系中ddNTP的浓度。