分子生物学研究中，需要配制多种试剂、标样和凝胶等，以下是实验室现有有关母液和药品：10%SDS母液；5×TBE母液；10mg/ml的溴化乙锭母液。NaCl的分子量为58.5；EcoR Ⅰ的分子量为125；BamH Ⅰ的分子量为415；EtBr的分子量为394；EDTA的分子量为416；Tris的分子量为121；HCl的分子量为36.5；琼脂糖(Agarose)的分子量为204。
请利用以上物品，进行下列实验操作：
(1)某一试剂1倍浓度的配方为0.15M Tris；200mM NaCl；pH值为8.0。请配制400毫升10倍浓度的母液(10×)。
(2)配制200毫升1%的琼脂糖胶，含1μg/ml的溴化乙锭；0.5×的TBE缓冲液。
(3)用浓度为400μg/ml的商用DNA标样配制200μL，25μg/ml的DNA分子量标样。
(4)现有浓度为25μg/ml的DNA样品，需要进行EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切，已知这二种酶可以用同一种酶切缓冲液。请写出对200ng DNA进行酶切反应的配方，请将反应体积定在15μl。
参考答案：计算各组分用量如下：
Tris用量：10×0.15mol/L×0.400L×121g/mol=72.6g；
NaCl用量:10×200/1000mol/L×0.400L×58.5g/mol=46.8g。
配制过程：分别称取Tris 72.6g，NaCl 46.8g，置于烧杯中，加入400ml超纯水或蒸馏水溶解，用盐酸调节pH值至8.0，混匀即可。
(2)计算各组分用量如下：
琼脂糖用量：200ml×1%g/ml=2g；
溴化乙锭用量：200ml×1μg/ml÷10μg/ml=20μl；
所需TBE量：200ml×0.5÷5=20ml。
配制过程：称取2g琼脂糖放入锥形瓶中，加入180ml超纯水或蒸馏水，加入5×TBE母液20ml，用微波炉加热至沸腾3次以上(或121℃湿热灭菌15min)，待溶液冷却至50～60℃，加入10mg/ml的EtBr 20μl，轻轻震荡混匀，倒入模具中即可。
(3)计算DNA用量：200μl×25÷400=12.5μl
配置过程：用移液器吸取400μg/ml的商用DNA标样12.5μl，加入187.5μl无菌超纯水(可事先灭菌)，吹打均匀即可。
(4)进行酶切反应的配方如表附录5-1所示。
操作过程：将酶切体系至于37℃恒温条件反应1h后65℃加热10min，使酶变性失活终止反应。 表附录 5-1 EcoR Ⅰ 0.2μL BamH Ⅰ 0.2μL 10×buffer 1.5μL 10×BSA 1.5μL DNA 8μL(200ng) ddH2O 3.6μL