问题 问答题

什么叫做酵母双杂交实验有何应用价值

答案

参考答案:酵母双杂交是一种在体外检测蛋白质间相互作用的实验体系。酵母双杂交体系巧妙地利用真核生物转录调控因子的组件式结构特征(modular),编码已知蛋白的DNA序列连接到带有酵母转录调控因子(常为GAL1或GAL4等)DNA结合结构域编码区(BD)的表达载体上导入酵母细胞中表达作为“诱饵”,装饰已知的编码转录激活结构域(AD)的DNA分别与待筛选的cDNA片段先连获得“猎物”载体导入“诱饵”的酵母细胞中表达。由于单独BD不能激活基因转录,而由不同转录调控因子BD和AD形成的杂合蛋白可以行使激活转录功能,引发报告基因表达。因此通过检验不同系列酵母细胞中报告基因的表达活性即可获得与已知蛋白相互作用的蛋白因子。
酵母双杂交是较为有效的筛选相互作用蛋白的技术。

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