参考答案：将一个平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位点中，基本步骤如下：
(1)将平末端片段利用甲基化酶处理，保护其中的EcoRⅠ识别序列。如果平末端序列中不含EcoRⅠ位点，则此步骤省略。
(2)使平末端DNA片段连接上一个人工设计合成的接头，即带有EcoRⅠ识别序列的双链末端。可通过设计与平末端DNA片段两端互补的PCR引物，两侧引物的5’端都带有EcoRⅠ的限制性内切酶识别序列(GAATTC)。经PCR扩增原平末端片段后，纯化得到带有EcoRⅠ识别位点的平末端DNA。
(3)利用EcoRⅠ切割该片段，产生带有EcoRⅠ黏性末端的片段。
(4)通过DNA连接酶的作用，将处理后的片段插入到EcoRⅠ限制位点中。