问题
问答题 简答题
限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项有哪些?
答案
参考答案:
一类专门切割DNA的酶,它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列。并切割dsDNA。
所谓限制(restriction)=切割(clearagE.=水解(hydrolysis)该部位的核苷键(磷酸二酯键)限制酶都是从原核生物中发现的(400多种E/350M)。所有的限制酶可分成3类。
(1)Ⅰ、Ⅲ型,兼具限制与修饰活性,它们识别与切割顺序不在一个地方,不产生特异性的DNA片段,与基因工程意义不大(有说Ⅲ型识别核苷酸切割的位点一致,但罕见)。
(2)Ⅱ型基因工程说到的限制酶是Ⅱ型酶,具有此类酶的微生物限制-修饰系统分别由限制酶和甲基化酶来完成。Ⅱ型酶分子量小,仅需Mg2+作为催化反应的辅因子,识别与切割位点相同,产生特异的DNA片段。