以下关于流式细胞分析法检测细胞因子的步骤描述错误的是（）

A.分离和培养待检细胞

B.常使用4%多聚甲醛固定细胞

C.用含5%脱脂奶粉和钙、锂离子的PBS溶液，重悬已固定的细胞，封闭非特异性结合位点

D.用荧光素标记的细胞因子特异性单克隆抗体做荧光抗体染色

E.用流式细胞仪分析荧光阳性细胞百分比和荧光强度