试述原生质体分离的方法和步骤。
参考答案:
(1)机械法:在细胞质壁分离的状态下,用利刀切割细胞壁,使原生质体流出或释放出来。
(2)酶解法:常用的制备原生质体的酶包括;果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。实际应用中需要根据不同的细胞来源选择合适的酶。
酶解法分:
顺序法(两步法):先用果胶酶预处理,再用纤维素酶直接法(一步法):直接用果胶酶和纤维素酶
优点:获得量大,适用广泛。
缺点:商品酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。会影响所获原生质体的活力。
试述原生质体分离的方法和步骤。
参考答案:
(1)机械法:在细胞质壁分离的状态下,用利刀切割细胞壁,使原生质体流出或释放出来。
(2)酶解法:常用的制备原生质体的酶包括;果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。实际应用中需要根据不同的细胞来源选择合适的酶。
酶解法分:
顺序法(两步法):先用果胶酶预处理,再用纤维素酶直接法(一步法):直接用果胶酶和纤维素酶
优点:获得量大,适用广泛。
缺点:商品酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。会影响所获原生质体的活力。