参考答案：

第一步：粗提。纯化粗样快速浓缩（减少体积）和稳定样品（去除蛋白酶）

最适用层析技术：离子交换/疏水层析

第二步：中度纯化。去除大部分杂质

最适用层析技术：离子交换/疏水层析

第三步：精细纯化。达到最终纯度（去除聚合物，结构变异物）

最适用层析技术：凝焦过滤/离子交换/疏水层析/反相层析