女性，55岁。左上后牙牙龈反复肿痛近1年，且口腔内有臭味。因糖尿病控制饮食约2年。检查：左上第二磨牙远中邻面龋深达髓腔，探无感觉，叩诊（±），根尖部龈红；左上第一磨牙咬合面龋，中等深度，探酸感，远中根尖部牙龈扪压有稀脓液从一窦道口溢出；左上第三磨牙低位颊倾。左后牙牙龈轻红肿，牙石（++），全口口腔卫生差，牙垢（++）。余未见异常。

根据病史和检查，患者的主诉患牙最可能是（）

A.左上第一磨牙

B.左上第二磨牙

C.左上第二前磨牙

D.左下第一磨牙

E.左上第三磨牙

简要叙述轮虫一次性培养、半连续培养和大面积土池培养方法。