某病人血涂片，经瑞氏染色后，观察时发现血涂片异常蓝染，且布满颗粒

异常蓝染的原因最可能的是（）

A.用新推片制备血涂片

B.缓冲液偏碱

C.染料配制时间过长

D.用已处理过的新玻片制备血涂片

E.用自来水冲洗

公司申请公司债券上市交易，其债券实际发行额不少于人民币（）

A.5000万元

B.8000万元

C.1亿元

D.2亿元