参考答案：C

解析：[解题思路] 3，5，7，2'，4，-五羟基黄酮和3，5，7，3，，4'-五羟基黄酮的区别在于β环羟基的位置不同，前者为2'，4'间位二羟基，后者为3'，4，邻位二羟基。要将二者分离，采用水-乙醚液萃取法，这两个游离的黄酮类化合物都分配在乙醚层，无法分离。采用pH梯度法，这两个化合物的酸性相似，无法分离。采用碱溶解酸沉淀法，这两个化合物同时在碱中溶解，酸中沉淀，无法分离。采用SephadexG层析法，这两个化合物分子量相同，而且不溶于水，不能应用。具有邻二酚羟基的游离黄酮的邻二酚羟基可与硼酸结合，生成水溶性的化合物，而不具邻二酚羟基的游离黄酮则不溶于水，溶于低极性或中等极性的有机溶剂，从而可将二者分离，故本题最佳答案为C。