实时荧光定量PCR检测HCV-RNA，室间质评的5个样本定量结果均低于靶值。

如果以上因素均已排除，首要考虑的因素是（）

A.标准曲线的制定

B.温度

C.标志物的活性

D.加样枪的校准

E.离心机的校准

灵峰、灵岩和大龙湫并称为雁荡风景的三绝，是雁荡精华之所在。