参考答案：D

解析：[考点] 重组DNA技术的相关概念
[分析] 重组DNA技术中常用的工具酶有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、 DNA聚合酶Ⅰ、反转录酶、多聚核苷酸激酶、末端转移酶及碱性磷酸酶等，但不需要拓扑异构酶，故应选D。