参考答案：

①不能区分死活细胞；

②一些小的细胞在显微镜下很难看到，有些细胞也可能被丢失；

③很难获得精确的计算；

④样品不被染色时，需要相差显微镜；

⑤对低浓度悬浮液不适用。细菌悬浮液细胞浓度低于106个时，视野中无菌；

⑥计数前须对运动的细胞固定。