问题 问答题 简答题

简述PCR及其临床应用。

答案

参考答案:

聚合酶链反应(PCR):利用DNA聚合酶(如TagDNA聚合酶)等在体外条件下,催化一对引物间的特异DNA片段合成的基因体外扩增技术。引物:单链DNA片段。过程:变性DNA双链-单链(93~98℃),退火引物与模板结合(37~65℃),延伸双链合成(70~75℃)。常见PCR技术的类型:原位PCR、逆转录PCR(RT-PCR)及定量RT-PCR、反向PCR、PCR-SSCP、PCR-ELISA.固相锚定PCR、mRNA差异显示逆转录PCR。PCR的应用:(1)在感染性疾病中的应用:对传染性疾病进行病原学确证诊断;对病原体进行基因分型和同源性比较;克隆病原体各种蛋白质的基因,用于蛋白表达,制备诊断试剂或疫苗;发现新病原体;克隆病原体各种基因,建立基因表达载体,用于基因治疗。(2)遗传性疾病的基因诊断:发现的遗传病有4000多种;产前诊断PCR-RFLP;PCR-ASO。(3)肿瘤的研究及诊断:癌基因与抑癌基因。(4)在法医学中的应用:个人认识;亲子鉴定。(5)其他应用:DNA克隆;引入点突变、缺失或插入;重组PCR;DNA测序;示差PCR。

单项选择题 A1型题
单项选择题

北京市欣欣商贸公司为增值税一般纳税人,兼营商品加工、批发、零售和进出门业务, 2008年12月相关经营业务如下:
(1) 进口烟丝一批,支付国外的买价220万元、购货佣金6万元、国外的经纪费4万元;支付运抵我国海关地前的运输费用20万元、装卸费用和保险费用11万元;支付海关地再运往商贸公司的运输费用8万元、装卸费用和保险费用3万元;
(2) 受托加工化妆品一批,委托方提供的原材料不含税金额86万元,加工结束向委托方开具专用发票收取加工费和添加辅助材料的含税金额共计46.8万元,该化妆品商贸公司当地无同类产品市场价格;
(3) 收购免税农产品一批,支付收购价款70万元、运输费用10万元,当月将购回免税农产品的30%用于公司饮食部;
(4) 购进其他商品,取得增值税专用发票,支付价款200万元、增值税34万元,支付运输单位运输费用20万元,待货物验收入库时发现短缺商品金额10万元(占支付金额的 5%),经查实应由运输单位赔偿;
(5) 将进口烟丝的80%重新加工制作一种新型健康型烟丝,该销售情况如下:当月销售给其他商场并开具增值税专用发票,取得不含税销售额650万元;直接销售给消费者个人,开具普通发票,取得含税销售额70.2万元;
(6) 销售除烟丝以外的其他商品,开具增值税专用发票,应收不含税销售额300万元,由于月末前可将全部货款收回,给所有购货方的销售折扣比例为5%,实际收到金额285万元;
(7) 取得上期外购卷烟卷烟的逾期包装押金收入14.04万元。
(注:关税税率20%,化妆品、烟丝消费税税率30%;当月购销各环节所涉及到的票据符合税法规定,并经过税务机关认证。)
要求:按下列顺序回答问题:

国内销售环节应缴纳的增值税合计( )万元。

A.120.45

B.61.45

C.63.45

D.65.18