问题 问答题 简答题

植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项

答案

参考答案:

1.建立细胞株

(1)材料准备

a.确定植物种类品种

b.选择单细胞或愈伤组织或叶肉、下胚轴等

c.借助酶处理:酶的种类、浓度、处理时间都对材料有一定影响

(2)制备细胞悬浮液

a.培养基成分筛选

b.悬浮培养,振荡次数为80~90次/min

c.用200~300目钢网过滤盒离心沉降

2.选择细胞株

平板筛选

a.细胞起始密度(0.5-2.5)*105个/ml

b.固体薄层培养基

c.按目标反复进行测定

3.扩大培养(或分化培养)

(1)扩大培养(悬浮)

(2)分化培养(固体)

抗性分析(生化分析)

4.鉴定分析

(1)扩大培养:鉴定提取:多次重复测定(生化分析)

(2)分化培养:植株再生

鉴定遗传分析:抗性测定、生化分析、遗传分析

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