问题
问答题
怎样分离提纯蛋白质
答案
参考答案:分离提纯蛋白质主要是根据蛋白质的性质差异进行的,包括蛋白质的大小与形状、溶解度、电荷、吸附性及对配基的生物学亲和力来分离纯化蛋白质。分离提纯某一蛋白质的一般步骤可分为前处理、粗分级分离和细分级分离。前处理主要是把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来,保持天然状态;粗分级分离是将所要的蛋白质与其他杂蛋白分离开来;细分级分离是指样品的纯化。(1)根据分子大小不同的分离方法:①透析和超过滤;②密度梯度离心;③凝胶过滤;(2)利用溶解度差别的分离方法:①等电点沉淀和pH控制;②蛋白质的盐溶和盐析;③有机溶剂分离方法;④利用温度对蛋白质溶解度的影响;(3)根据电荷不同:①电泳;②离子交换层析;(4)蛋白质选择吸附分离:①羟基磷灰石层析;②疏水作用层析;(5)根据对配基的生物学特异性的分离方法:亲和层析。