问题
问答题
用阳离子交换树脂分离以下氨基酸,Asp(pI=2.97)、His(pI=7.59)、Arg(pI=10.76)和Met(pI=5.79) 混合物,用pH 7的缓冲液洗脱时,哪种氨基酸先洗脱下来并说明原因。
答案
参考答案:其洗脱顺序为:Asp、Met、His、Arg离子交换层析是根据氨基酸的带电性质进行分离的一种方法,若用阳离子交换树脂进行分离,必须将氨基酸混合液pH调为2~3,此时氨基酸主要以阳离子存在,上柱后,可与提前用碱处理成钠型的Na + 交换,而被挂在树脂上,氨基酸结合牢固程度主要取决于它们之间的静电引力,由题目可知,与阳离子树脂结合力由强到弱的顺序为:Arg、His、Met、Asp,因此用pH 7的缓冲液洗脱时,Asp最先洗脱下来,然后依次Met、His、Arg。