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扼要说明亚硝酸、甲基磺酸乙脂(EMS)和紫外线的诱变机理。

答案

参考答案:

1.亚硝酸引起的氧化脱氨反应。凡是含有NH2基的碱基(A、G、C)都可以被亚硝酸作用产生氧化脱氨反应,使氨基变为酮基,然后改变配对性质,造成碱基转换突变。它与碱基类似物的突变机制相似,差别只在于碱基类似物是在DNA复制时由外界渗入,而亚硝酸是氧化DNA链上已有的碱基。但是它们同样需要两轮复制才能产生稳定的突变。在亚硝酸作用下,胞嘧啶可以变为尿嘧啶,复制后可引起G·C→A·T转换;腺瞟呤可以变为次黄嘌呤(hypoxanthine),复制后可引起A·T→G·C的转换;鸟嘌呤可以变为黄嘌呤(xanthine),它仍旧与C配对,因此不引起突变。尿嘧啶和次黄嘌呤都可以为各自的糖基酶修复系统所修复,如果当修复系统还未来得及修复时DNA就开始复制,前二者则导致突变。

2.甲基磺酸乙脂(EMS)为一种烷化剂,它主要引起碱基烷基化。烷基化位点主要在鸟嘌呤的N-7位上和腺嘌呤N-3位上,在腺嘌呤的N-7位有时也可以烷基化。由于鸟嘌呤上N-7的烷基化,使之成为带一个正电荷的季铵基团,这个季铵基团产生两个效应:一是促进第1位氨基上氢的解离,使G不再与C配对而是与T配对,从而造成G·C→A·T转换。二是当N-7成为季铵基团后,减弱了N-9位上的N-糖苷键,而产生了去嘌呤作用。大部分的无嘌呤位点都可以被无嘌呤内切酶系统所修复,但是有时复制在修复之前进行,则在无碱基的位置上可以插入任何一个碱基。在第二轮复制以后,原来的G·C对可以变为任何碱基对G·C、C·G、A·T、T·A。既有转换,又有颠换。用较低的pH或较高的温度或二者结合去处理噬菌体DNA,则可产生去嘌呤作用。这样处理过的噬菌体DNA在复制时可产生大量的颠换突变,这与烷化剂的作用机制是一致的。

3.紫外线照射DNA时由于高能粒子的直接作用和自由基的间接作用,引起DNA分子的各种损伤,嘧啶二聚体是其中一种重要的损伤。这些损伤,诱发了错误的SOS修复系统,从而导致很高的突变率。

紫外线引起突变包括各种形式的转换和颠换。突变不是完全随机的,G·C→A·T转换最多,而且有某种序列优先性,如C处在TCA序列中产生的C→T转换率要比在ACA序列中高15倍。除碱基替代突变外,紫外线还能引起缺失、重复和移框突变。这些突变可能是直接作用、间接作用和SOS系统共同作用的结果。

单项选择题
单项选择题 A1/A2型题