问题 单项选择题

常用于标记双链DNA3’端的酶是()

A.Klenow片段

B.连接酶

C.碱性磷酸酶

D.末端转移酶

答案

参考答案:A

解析:

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段(E. coliDNA Pol Ⅰ Klenow fragment),又叫做Klenow聚合酶或Klenow大片段酶。它是由大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ全酶,经枯草杆菌蛋白酶(一种蛋白质分解酶)处理之后,产生出来的分子量为76×103dal的大片段分子。 Klenow聚合酶仍具有5’→3’的聚合活性和3’→5’核酸外切酶活性,但失去了全酶的5’→3’的核酸外切酶活性。在DNA分子克隆中,Klenow聚合酶的主要用途有:a.修补经限制酶消化的DNA所形成的3’隐蔽末端;b.标记DNA片段的末端; c.cDNA克隆中的第二链cDNA的合成;d.DNA序列测定。

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