简述第二信使cAMP的发现及生成的实验证明(20分)。
参考答案:
AIEG年Earl Sutherland 及其同事们在研究狗肝组织中糖原是如何断裂时发现了cAMP,这是代谢研究的一个重要里程碑。 Sutherland 鉴定了从膜颗粒中释放出的物质是一种小分子的环状单磷酸腺苷,即cAMP。由于cAMP是激素作用膜受体后释放出来的,并且能激活磷酸化酶的活性,所以cAMP被称为第二信使。Joseph Orly 和Micheal Schramm通过细胞融合实验首先证明了受体与腺苷酸环化酶是不同的两种蛋白。用于融合实验的两个细胞中一个是带有肾上腺激素受体但缺少腺苷酸环化酶的红细胞,另一个是带有腺苷酸环化酶但缺少肾上腺激素受体的肿瘤细胞。细胞融合以后,加入肾上腺激素能够产生cAMP,而在未融合的细胞中加入肾上腺激素则不会有cAMP的产生虽然证明了激素受体和腺苷酸环化酶是两个独立的成员,但是,同受体结合的激素又是如何激活腺苷酸环化酶 最早是通过一种称为cyc—突变的肿瘤细胞系发现GTP能够增强激素对腺苷酸环化酶的激发作用。这种突变细胞具有正常的腺苷酸环化酶和肾上腺激素受体,但是用肾上腺素处理不能促进cAMP的生成。如果在该细胞培养基中加入从正常细胞分离的G蛋白,就能够恢复对cAMP合成的激发作用。由于这种G蛋白能促进(stimulating) cAMP的合成,故称之称为Gs。