参考答案：

①km是当酶反应速度到达最大反应速度一半时的底物浓度。

②km是酶的特征性常规数，它只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。

③在已知km值的情况下，应用米氏方程可计算任意底物浓度时的反应速度，或任何反应速度下的底物浓度。

④km不是ES络合物的解离常数，ES浓度越大，km值就越小，所以最大反应速度一半时所需底物浓度越小，则酶对底物的亲和力越大，反之，酶对底物的亲和力越小。