患者男性，33岁，间歇发热2周，食欲不振，大便3～4次/天。查体：前胸可见红色斑丘疹，左肋缘下可触及脾脏。化验：外周血白细胞低，肥达试验结果为O 1:80、H 1:160、A1:320、B1:40、C1:40。

其最可靠的诊断方法是

A．直接镜检

B．分离培养

C．生化鉴定

D．肠毒素鉴定

E．血清学诊断