下面是利用双脱氧法对未知DNA序列进行测定的电泳凝胶图,请根据电泳结果写出被测DNA的序列。
参考答案:[答题要点]
(1)写出测序凝胶上的核苷酸序列:5’AGGCTGACGGA 3’
(2)写出上述序列的互补序列: 3’TCCGACTGCCT 5’
(3)按照5’→3’写出被测序列: 5’TCCGTCAGCCT 3’
解析: 双脱氧法测定DNA序列的原理。
[知识扩展] 从样品在电泳琼脂糖凝胶中运动速度与分子大小的关系可知,分子量较小的核苷酸走在凝胶的底部,因此第一步读取凝胶中核苷酸的序列,我们也可以从上往下读,只是注意写出的序列与常规写法不同,此时左边是DNA的3’,而右边是5’,即
3’AGGCAGTCGGA 5’
而后直接对应写出其互补序列,该序列正好是5’在左边,即
5’TCCGTCAGCCT 3’
这个方法比答题要点给出的方法更为简单,只需要两步,而且不易出错。