患儿男，7个月，早产儿，出生体重2000g，母乳喂养，尚未添加辅食和维生素D。易烦躁、多汗、夜惊。平日多在家中。查体：有枕秃。

如病情进展检查可能发现（）。

A.血钙降低

B.血磷降低

C.血磷升高

D.血碱性磷酸酶降低

E.血碱性磷酸酶升高

F.骨X线示长骨干骺端呈毛刷样改变

G.长骨临时钙化带增宽

人类在预防与诊疗传染性疾病的过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如右图：

请回答：

过程②构建A基因表达载体时，必须使用（）和（）两种工具酶。