描述Meselson-Stahl试验。
参考答案:
1957年M.Meselson和F.stah1设计的CsCl超离心实验证实了DNA半保留复制的机理。具体过程如下:
(1)大肠杆菌在15N培养基中经多代培养,得到的DNA两条链都被标记形成“重链”。
(2)细胞移到14N中,这样新产生的链都被标记为“轻链”。
(3)选择不同时间,从14N培养基中取出细胞,提取DNA。
(4)将DNA溶解在CsCl溶液中,100000 g离心。
(5)经过若干小时的离心,达到平衡,此时扩散力恰好与离心力平衡。这样,DNA在离心管聚集成带,每条带的密度均与该点的CsCl溶液的密度相同。
(6)照相决定每条带的位置和所含的DNA量。①经15N培养基培养,所有的DNA都聚集在一条重带。②在14N培养基中培养一代后,所有的DNA形成一条中间密度的带,位于纯14N-DNA和纯15N-DNA形成的带之间。如果认为复制是半保留的,每一个子代分子中含有一条旧的重带和一条新的轻带,那么与这个实验结果相符。③在14N中继续培养一代,子代DNA中的一半是中间密度,另一条则是轻带,该结果又可由DNA的半保留复制预测到。在以后的样品中,中间密度的DNA的比例恰如预期一样逐渐减少。④用加热的方法使来自第一代杂交DNA分子变性,分成两条单链后离心,发现有一条“重”带和一条“轻”带,从而有力地证明第一代的分子是双链且为半保留复制。