参考答案：

Southern杂交操作步骤：

（1）用限制性内切酶酶切DNA，经凝胶电泳分离各酶切片段；

（2）转膜：将DNA片段转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上；

（3）预杂交：封阻滤膜上非特异性位点；

（4）杂交：让探针与同源DNA片段特异性结合；

（5）洗脱：去除非特异性结合的探针；

（6）自显影检查目的DNA所在的位置。

Southern杂交影响因子

1）、目的DNA在总DNA中所占的比例

2）、探针的大小和标记效率

3）、转移到滤膜上的DNA量

4）、探针与靶DNA的同源性